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P388D1  小鼠淋巴樣瘤細胞

P388D1 小鼠淋巴樣瘤細胞

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P388D1 小鼠淋巴樣瘤細胞 詳細資料

P388D1  小鼠淋巴樣瘤細胞

P388D1  小鼠淋巴樣瘤細胞

商品屬性

P388D1  小鼠淋巴樣瘤細胞

鑒定

STR鑒定正確

種屬

小鼠

生長特性

懸浮生長

細胞形態(tài)

淋巴母細胞樣

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

小鼠細胞系

 

P388D1  小鼠淋巴樣瘤細胞


商品介紹

P388D1  小鼠淋巴樣瘤細胞

細胞別稱;P-388D1; P388-D1; P388.D1; P3 88 D1

種屬來源;小鼠

組織來源;淋巴瘤

生長特性;懸浮生長

細胞形態(tài);淋巴母細胞樣

背景簡介;P388D1細胞來源于甲基膽蒽誘導形成的淋巴瘤;在LPS和佛波酯的誘導下,P388D1細胞可以產生IL-1,還可以產生;可以吞噬酵母多糖和乳膠微球,在抗體依賴的、細胞介導的細胞毒系統(tǒng)中有活性。P388D1細胞表面免疫球蛋白(sIg)陰性,鼠痘病毒陰性。

供應限制;僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用

細胞代數(shù);10代以內

細胞處理:

P388D1  小鼠淋巴樣瘤細胞
1) 凍存細胞的復蘇:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

P388D1  小鼠淋巴樣瘤細胞

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟:

P388D1  小鼠淋巴樣瘤細胞
(1)當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時,進行傳代。

(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。

(3)加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落,加入2倍量的中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。

(5)細胞懸液吸至離心管內,1000rpm/min離心3~5min。

(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細胞,吹打細胞使其均勻分散。

(7)吸棄細胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。

(8)根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

(9)細胞凍存

P388D1  小鼠淋巴樣瘤細胞

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細胞接收后的處理:

P388D1  小鼠淋巴樣瘤細胞
1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。


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