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大鼠白血病病毒PCR檢測試劑盒反應五要素
點擊次數:760 更新時間:2021-03-25

大鼠白血病病毒PCR檢測試劑盒反應五要素:

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:

①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至0kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒
小鼠心肌肌鈣蛋白(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒
小鼠小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3(AFP-L3)ELISA試劑盒
小鼠小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)ELISA試劑盒
小鼠小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體(AFP-L)ELISA試劑盒
小鼠腺苷高半酶(AHCY)ELISA試劑盒
小鼠腺病毒IgG抗體(ADV IgG)ELISA試劑盒
小鼠纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒
小鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI-)ELISA試劑盒
小鼠纖溶酶原激活劑抑制物(PAI-)ELISA試劑盒
小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA試劑盒
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小鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒
小鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒
小鼠細胞周期素D(Cyclin-D)ELISA試劑盒
小鼠細胞因子信號轉導抑制因子3(SOCS-3)ELISA試劑盒
小鼠細胞因子信號轉導抑制因子(SOCS-)ELISA試劑盒
小鼠細胞外信號調節激酶(ERK)ELISA試劑盒
小鼠(Cyt-C)ELISA試劑盒

 

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