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犬脂肪酸結合蛋白elisa檢測試劑盒抗體的間接法
點擊次數:800 更新時間:2020-07-29

犬脂肪酸結合蛋白elisa檢測試劑盒抗體的間接法

.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至~0μg/ml,每孔加0.ml,4℃過夜。
 
2.次日洗滌3次。
 
3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,*后一遍用DDW洗滌。
 
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃0~30分鐘。
 
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
 
6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O·D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔O·D值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

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