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大鼠,4,5-三磷酸肌醇(IP3)試劑盒
點(diǎn)擊次數(shù):876 更新時(shí)間:2020-05-28

大鼠,4,5-三磷酸肌醇(IP3)試劑盒樣本處理及要求

.  血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過夜,然后000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2.  血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 000×g離心5分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3.  組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.0M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測量結(jié)果),稱重后將碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按:9的重量體積比,比如g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~0分鐘,取上清檢測。

4.  細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注:標(biāo)本溶血會(huì)影響后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。

[需要而未提供的試劑和器材]

.酶標(biāo)儀(450nm)

2.高精度加樣器及槍頭:0.5-0uL、2-20uL、20-200uL、200-000uL

3.37℃恒溫箱

4.蒸餾水或去離子水

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