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滅鮭氣單胞菌PCR定量試劑盒陽性對照反應體系
點擊次數(shù):940 更新時間:2020-05-21

滅鮭氣單胞菌PCR定量試劑盒陽性對照反應體系:

a)模板DNA:選用樣本純化的DNA。

b)引物的選擇:建議選擇該樣本較易擴增的基因的引物,如 β-actin 基因或 GAPDH 等。

4.2 陰性對照

PCR反應體系被污染會導致PCR結果出現(xiàn)假陽性,需要設置陰性對照來排除。將使用的移液器槍頭浸泡在2× Blood Master Mix中,添加引物,ddH2O進行PCR擴增;另取ddH2O作為模板,用目的基因引物進行PCR擴增,以排除PCR體系是否被污染和實驗是否有其他污染源。

注意事項


. 盡量使用新鮮抗凝血。若凍存血,應避免反復凍融。

2. 解凍后2× Blood Master Mix可能出現(xiàn)渾濁,冰上放置-2 min,待溶液澄清后,上下顛倒混勻,不影響試劑性能。

3. 電泳檢測時,切勿使用含有 SDS 的Loading Buffer,否則在電泳時會在泳道中出現(xiàn)一大團拖尾亮帶,影響實驗結果。
4. 建議擴增片段長度 kb以內,以便擴增效率*。

5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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