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豚鼠α干擾素(IFN-α)elisa試劑盒操作步驟
點擊次數:860 更新時間:2020-04-09

豚鼠α干擾素(IFN-α)elisa試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(elisa)。往預先包被豚鼠α干擾素(IFN-α)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豚鼠α干擾素(IFN-α)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
 操作步驟
.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體00μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育5min。
7.每孔加入終止液50μL,5min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
 

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