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技術(shù)文章

Elisa試劑盒檢測(cè)抗生素的原理
點(diǎn)擊次數(shù):791 更新時(shí)間:2019-10-28
       氨基糖類、四環(huán)素類、喹諾酮類、硝基呋喃類等。目前國(guó)內(nèi)外可以用ELISA方法檢測(cè)的抗生素有:、、四環(huán)素、、呋喃它酮、、、泰樂(lè)菌素、磺胺喹惡啉、、鹽霉素、磺胺類、阿維霉素、ELISA試劑盒檢測(cè)成本低靈敏度高檢測(cè)限通常可以達(dá)到*,是一種理想的初篩方法。但由于ELISA方法存在一定的假陽(yáng)性率,因此用美聯(lián)免疫吸附法測(cè)定的陽(yáng)性樣品必須做進(jìn)一步的確定實(shí)驗(yàn)。
  現(xiàn)在已ELISA試劑盒檢測(cè)為例介紹;本試劑盒適用于牛奶、肉類、魚、蝦、血清、及蜂蜜中的殘留量的測(cè)定。
  (一)測(cè)定原理
  測(cè)定的基礎(chǔ)是抗原抗體放映。微孔板包被有針對(duì)兔IgG(抗體)的羊抗體。加入抗體、標(biāo)記物、標(biāo)準(zhǔn)或樣品溶液、游離與酶標(biāo)記物競(jìng)爭(zhēng)抗體,同時(shí)抗體與羊抗體連接。沒(méi)有連接的酶標(biāo)記物在洗滌步驟中被去除。將酶基質(zhì)(過(guò)氧化尿素)和發(fā)色劑(四甲基聯(lián)苯胺)加入到空中并且孵育。結(jié)合的酶標(biāo)記物將無(wú)色的發(fā)色劑轉(zhuǎn)化為藍(lán)色的產(chǎn)物。加入反應(yīng)停止液后使眼色由藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。在450nm處測(cè)量,吸收光強(qiáng)度與樣品中的濃度成正比
  (二)試劑盒指標(biāo)
  特異性
  通過(guò)對(duì)形影的物質(zhì)進(jìn)行交叉反應(yīng)性分析得到
  00%堿0.5%<0.05%
  余四環(huán)霉素變暗霉素?zé)o交叉反應(yīng)
  回收率
  牛奶>80%魚蝦肉>80%
  蜂蜜>80%蛋類>80%
  (三)提供的試劑
  、96孔(2條*8孔)包被有羊抗體。
  2、濃縮標(biāo)準(zhǔn)液;為標(biāo)準(zhǔn)溶液。
  3、過(guò)氧化物酶標(biāo)記的濃縮液:0.7mL
  4、抗體濃縮液0.7ml
  5、基質(zhì)(7ml)含有氧化尿素
  6、四甲基聯(lián)苯胺(TMB)30%過(guò)氧化氫,牛血清白蛋白,圖文20等
  7、反應(yīng)停止液mol/L硫酸
  8、緩沖液:00ml用于標(biāo)準(zhǔn)酶標(biāo)記物抗體樣品稀釋
  9、緩沖液2:ml,用于測(cè)定牛奶樣品時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)稀釋用緩沖液

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