白介素2 ELISA試劑盒的標準化操作流程與注意事項全解析
點擊次數:24 更新時間:2025-04-26
白介素2 ELISA試劑盒在檢測白介素2的含量方面具有重要應用,以下為你詳細介紹其標準化操作流程與注意事項。
??一、操作流程??
1.??實驗準備??
準備實驗所需的各種器材、試劑等,確保試劑盒在有效期內,且試劑儲存條件符合要求。
將試劑盒平衡至室溫,一般需30分鐘。
2.??樣本處理??
對待檢測樣本進行適當處理,如血清樣本需充分離心去除雜質,細胞培養上清需經過過濾除菌等。
3.??加樣??
在微孔板的相應孔中分別加入標準品、質控品和樣本,每孔200μL,注意避免交叉污染。輕輕振蕩反應板,使樣品充分混勻。
??4.孵育??
將反應板置37℃溫箱中孵育1小時,讓樣本與包被的抗體充分結合。
5.??洗滌??
每孔加入350μL洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌3次,較后在濾紙上拍干。
6.??加酶標物??
每孔加入酶標物100μL,37℃溫箱孵育30分鐘。
7.??顯色與檢測??
加入顯色劑A、B液各50μL,37℃避光顯色15分鐘。接著加入50μL終止液,15分鐘內用酶標儀在450nm波長處測定OD值。
??二、注意事項??
1.操作過程要嚴格遵循無菌原則,防止樣本污染。
2.加樣時務必準確,注意每一孔的添加量和對應關系。
3.洗滌環節要完整,確保去除多余的底物和雜質,但又不能過度洗滌致使抗體丟失。
4.不同試劑盒的孵育時間和溫度可能會略有差異,需嚴格按照試劑盒說明書執行。
5.檢測過程中應盡量避免強光直射,以防止OD值異常。
只要嚴格按照標準化流程操作并注意相關事項,就能運用白介素2 ELISA試劑盒獲得準確可靠的檢測結果。